Анализы на боррелиоз и клещевой энцефалит: показания, методы исследования и расшифровка результатов

Несмотря на то, что клещевой вирусный менингоэнцефалит (КВМЭ) может вызывать тяжелые формы болезни и даже приводить к смерти, на ранней стадии развития этого заболевания его симптомы могут напоминать другие опасные болезни, такие как боррелиоз, полиомиелит, менингит, тиф и энцефалит, вызванные японским комаром. Поэтому очень важно провести дифференциальную диагностику как можно раньше, чтобы точно определить истинную причину возрастающих симптомов.

Необходимость различения КВМЭ и боррелиоза объясняется тем, что оба заболевания распространены в одних и тех же регионах и могут возникнуть после укуса клеща весной или летом. Если вы находитесь в эндемичном регионе и обнаружили клеща на своем теле, тогда вам нужно незамедлительно провести лабораторные исследования биоматериала. Если результат оказывается положительным, то нужно немедленно обратиться к инфекционисту или терапевту и принять экстренные меры в ближайшие 4 суток после укуса насекомого.

В данном обзоре рассмотрим, какие методы диагностики используются для обнаружения заболеваний, вызываемых КВМЭ и боррелиозом, а также какие показатели анализов являются сигналом для немедленных действий.

Существует множество заболеваний, которые могут быть перенесены при укусе клеща. Два наиболее распространенных из них - клещевой энцефалит и боррелиоз (болезнь Лайма) - можно заразиться даже на территории России. Эти инфекции часто путают, однако они являются разными заболеваниями. Клещевой энцефалит вызывается вирусом, тогда как клещевой боррелиоз - бактерией. Оба заболевания поражают центральную нервную систему (ЦНС), однако болезнь Лайма также может повредить суставы, кожу и сердечную мышцу.

Энцефалит чаще проявляется в острой форме, в то время как боррелиоз может переходить в хроническую стадию. После перенесенного энцефалита, организм приобретает продолжительный иммунитет, тогда как после заражения боррелиозом, иммунный ответ может задержаться, и аутоиммунные реакции могут развиваться постепенно, что может привести к следующей инфекции уже через 7 лет.

Каждое из этих заболеваний имеет свои характерные симптомы, которые постепенно проявляются по мере развития болезни. Если вы подозреваете, что можете быть заражены клещевым энцефалитом или боррелиозом, то следует обратиться к врачу и сдать необходимые анализы на выявление инфекции.

Болезнь Лайма, или боррелиоз, – это заболевание, которое не проявляется сразу после заражения организма. Для того, чтобы иметь действительно достоверные результаты диагностики, необходимо сдавать биоматериал в установленные сроки. Если же поспешить, можно получить ложноотрицательный результат, что сильно портит картину заболевания. Если же анализ дал ложноположительный результат, его следует проверить с помощью альтернативных методов диагностики или повторно сдать через определенный период времени, как это назначил врач.

При возникновении подозрений на клещевой боррелиоз необходимо сдать специальные анализы. Как правило, результаты становятся показательными спустя 2 недели после заражения. Сначала в крови обнаруживают антитела IgM, а затем - IgG. Максимальная концентрация антител достигается через 3 месяца. Если результаты первого анализа оказываются неоднозначными, то следует сдать иммуноблот, который поможет определить наличие заболевания более точно.

Подготовка

Для проведения серологического анализа специальной подготовки не требуется, однако специалисты лаборатории рекомендуют воздержаться от приема пищи за 4 часа до сдачи крови и не курить за 30 минут до проведения исследования. Если речь идет об анализе синовиальной или спинномозговой жидкости, то рекомендуется производить забор материала на том участке тела, где может находиться возбудитель, и проводить процедуру до начала антибактериальной терапии.

Особо важно уделить внимание процессу подготовки клеща, если вам необходимо сдать на него анализ на энцефалит. Схема универсальна, и такой же порядок действий следует соблюдать и для любого другого типа исследования. Если вы не можете обратиться в травмпункт, то можно сделать это самостоятельно. Для этого тельце клеща нужно перехватить пинцетом или пальцами, обернутыми в салфетку, и извлечь его вращательными движениями строго перпендикулярно ранке. После этого клеща помещают в емкость с ватным тампоном или тканевой салфеткой, смоченной в воде, и при этом не имеет значения, живой это клещ или мертвый. Главное, чтобы тело насекомого находилось во влажной среде. Контейнер или пробирку плотно закрывают крышкой и доставляют в лабораторию в тот же день для анализа клеща на боррелиоз. Высокая оперативность действий необходима не только для скорейшей помощи пострадавшему, но и для максимально точного исследования.

Для проведения лабораторных исследований необходимо взять кровь из вены. Ее помещают в стерильные пробирки, которые могут быть пустыми или заполненными специальным гелем. Отобранный материал годен для анализа на протяжении недели и, как правило, результаты готовы в тот же день. Но если планируется анализ методом вестерн-блота, то необходимо подготовиться к тому, что результаты будут готовы только через 6 дней.

Сбор суставной жидкости сопровождается пункцией. Врач вводит в пораженный сустав иглу диаметром 0,8 мм, чтобы забрать необходимый объем биоматериала. Процедура может быть довольно болезненной.

Забор спинномозговой жидкости производится в области поясничного отдела, чтобы не затронуть спинной мозг. Эта процедура осуществляется в стационаре под местной анестезией и контролем врача. Результаты исследования известны уже на следующий день.

Расшифровка результатов анализов может быть качественной или количественной. В первом случае результат может быть лишь положительным или отрицательным. Во втором - следует указывать точное количество антител в составе крови. Наличие или отсутствие заболевания оценивается по цифровым показателям, полученным в результате исследования.

Анализ на боррелиоз на антитела класса IgG расшифровывается следующим образом:

• результат менее 10 Ед/мл считается отрицательным, что означает, что у пациента нет инфекции или анализ был сдан слишком рано;
• при значении от 10 до 15 Ед/мл результат считается сомнительным;
• результирующее значение свыше 15 Ед/мл классифицируется как положительное. При этом положительный результат также может указывать на паренезированную в прошлом болезнь, а также на наличие у пациента других заболеваний, например, сифилис, бактериальный эндокардит или мононуклеоз. В любом случае, для окончательного вывода лучше повторить анализ через 1-2 недели.

Анализ на антитела класса IgM также имеет свои показатели:

• при значении менее 18 Ед/мл результат считается отрицательным;
• результирующее значение от 18 до 22 Ед/мл считается сомнительным;
• значение свыше 22 Ед/мл считается положительным. Как и в предыдущем случае, рекомендуется повторить анализ через 1-2 недели для получения окончательного ответа.

Статья про метод вестерн-блота: все, что нужно знать для правильного использования

Метод вестерн-блота используется для обнаружения антител к тем или иным антигенам. Результаты исследования выражаются в виде полос на тестовой мембране. Каждая полоса указывает на наличие или отсутствие антител к конкретному антигену. Результат теста может быть положительным, отрицательным или неопределенным.

Если антитела IgM обнаружены, тест будет считаться положительным. Если антитела не обнаружены, то результат будет отрицательным. Если слабые, неоднозначные полосы на тестовой мембране не позволяют делать выводы о наличии или отсутствии антител, то результат теста будет признан неопределенным.

Общее заключение по исследованию делается по каждому антигену, где ставится плюс или минус в зависимости от наличия или отсутствия антител. Метод вестерн-блота является эффективным при использовании в качестве дополнительного исследования.

Тем не менее, для получения более точных результатов, рекомендуется повторить тест через 3-6 недель после первого проведения. Это поможет исключить возможные ложноотрицательные или ложноположительные результаты.

Как сообщается, в результате анализа методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени, а также исследования клеща можно получить качественный ответ: обнаружена ДНК боррелии или она не обнаружена. Тем не менее, по одному анализу нельзя точно диагностировать боррелиоз, так как развитие этой болезни в организме человека происходит сложным процессом. Поэтому ни один метод нельзя считать исключительным. Важно не забывать о сдаче анализов на энцефалит, параллельно с исследованием клеща на боррелиоз, поскольку эти насекомые могут быть носителями обоих заболеваний одновременно и сдавать анализы на оба заболевания было бы разумным.

Клещевой энцефалит: лабораторная диагностика

Для диагностики клещевого энцефалита необходимо провести лабораторный анализ. Исследуется венозная кровь. Также проводят анализ клеща, который был удален с тела человека после укуса. Существуют различные методы, которые позволяют определить присутствие или отсутствие болезни у пациента.

Анализ методов диагностики клещевого энцефалита

Для диагностики клещевого энцефалита используется несколько методов, одним из которых является иммуноанализ. Этот метод анализа устанавливает, есть ли в крови специфические антитела к вирусу. В зависимости от класса антител IgG и IgM, можно сказать о недавнем заражении или о болезни на более раннем этапе. Сочетание результатов иммуноанализа и клинических признаков помогает в точной диагностике энцефалита. При этом, иммуноанализ имеет высокую чувствительность и может помочь в ранней диагностике болезни.

Еще одним методом диагностики клещевого энцефалита является ПЦР-исследование. Задача этого метода – установить, присутствует ли у клеща ДНК вируса клещевого энцефалита. Даже если клеща не удается удалить целиком, для исследования могут быть использованы его фрагменты. Однако, клещ должен быть принесен в лаборию немедленно после удаления. Статистика показывает, что в острый период болезни результат исследования крови при помощи иммуноанализа оказывается положительным в 96% случаев, а антитела IgM можно обнаружить уже на 4-й день после появления первых симптомов энцефалита.

Как правильно сдавать анализ на клещевой энцефалит?

Появление антител к вирусу происходит в крови человека через 10-14 дней после заражения. Поэтому, если сдавать анализы на энцефалит раньше, результат будет отрицательным. Пик концентрации антител наблюдается к концу месяца и сохраняется в течение полугода.

Если вы предполагаете, что вас укусил клещ, то необходимо его поместить в контейнер и как можно скорее доставить в лабораторию. В случае, если исследование подтвердит заражение клеща, пациент должен оставаться под наблюдением медицинского персонала и через 2 недели сдать анализ на энцефалит.

Кроме того, может потребоваться проведение стартовой этиотропной терапии, включающей внутривенное капельное введение ацикловира (10 мг/кг) три раза в сутки и внутримышечное введение рекомбинантных интерферонов-α-2.

Заметки о клещевом энцефалите и болезни Лайма

Каждый год в России регистрируется от 6 до 8 тысяч новых случаев болезни Лайма. Обычно она проявляется у детей до 15 лет и у молодых людей в возрасте от 25 до 45 лет. В сравнении с этим клещевой энцефалит гораздо реже встречается – от 5 до 6 тысяч заболевших ежегодно.

Клещевой энцефалит – это вирус, который относится к семейству флавивирусов из группы арбовирусов. Он передается через укусы таежных (Ixodes Persulcatus) и европейских лесных (Ixodes Ricinus), также известных как "собачьи", клещей. В некоторых случаях можно заразиться через желудочно-кишечный тракт, потребляя сырое молоко, содержащее вирус, которое получено от инфицированных коз, овец и коров.

Есть несколько штаммов вируса клещевого энцефалита, и российские эпидемиологи выделяют три основных: центрально-европейский, сибирский и дальневосточный. Среди этих трех субтипов наиболее опасен дальневосточный, который имеет самый высокий уровень летальности – от 20 до 40%. При заражении центрально-европейским субтипом смертельный исход встречается гораздо реже, не превышая 1-3%.

Вирус клещевого энцефалита нейротропный, то есть поражает центральную и периферическую нервную систему. Он может преодолевать гематоэнцефалический барьер, что приводит к изменениям в сосудах и оболочках мозга. Первые две недели после заражения болезнь протекает бессимптомно, но к 3-й неделе появляются симптомы, включающие высокую температуру, головную и мышечную боль, тошноту и отсутствие аппетита. У некоторых заболевших эти симптомы появляются еще позже – через месяц после заражения. С течением времени симптомы усиливаются, проявляясь в судорогах, параличе конечностей, дезориентации, потере сознания и, в конечном итоге, в летальном исходе, если своевременной помощи не будет оказано.

Подготовка к анализу на энцефалит

Для анализа крови на наличие энцефалита не требуется специальная подготовка. Однако перед посещением лаборатории врачи рекомендуют воздержаться от еды на протяжении четырех часов. Что касается исследования клеща, то необходимо извлекать его и доставлять на анализ аналогично тому, как это делается при обследовании на боррелиоз.

Исследование

Для проведения исследования кровь берется из локтевой вены. Получение результатов анализа на антитела класса IgM обычно занимает около 4 дней, в то время как результаты для класса IgG будут готовы через 6 дней. Анализ клеща на наличие энцефалита может занять до 3 дней.

Расшифровка результатов анализа на антитела IgG и IgM к клещевому энцефалиту

Количественное выражение результатов анализа крови на антитела IgG к клещевому энцефалиту представлено показателем концентрации антител вида титр. Титр может быть равен 1:100, 1:200, 1:400 и т.д. вплоть до 1:1600. Если титр превышает 1:100, это указывает на реакцию иммунной системы, которая может быть обусловлена перенесенной в прошлом инфекцией, результатом вакцинации или экстренным введением профилактического средства. Наоборот, титр менее 100 говорит о том, что организм не реагирует на вирус, и при попадании вируса человек неизбежно заболеет. Для здорового организма показатель титра колеблется в диапазоне 200–400.

Исследование на антитела IgM является качественным и представлено двумя показателями: "обнаружено" или "не обнаружено". Если в крови найдены IgG и отсутствуют IgM, можно предполагать, что результат положительный в связи с вакцинацией. Если же обнаружены оба показателя, это указывает на заражение энцефалитом. Чтобы получить более точный диагноз, рекомендуется повторить исследование через неделю.

Проводя исследование клеща, эксперты определяют наличие ДНК возбудителя заболевания. Если выявляется энцефалитный клещ, пациенту незамедлительно вводят специфический иммуноглобулин, который останавливает развитие вируса. По статистике исследований, данный метод эффективен и спасает в 60% случаев. Еще более надежная защита достигается путем плановой вакцинации. Однако, если человек стал жертвой клеща, это не означает, что он должен унывать и отказываться от своего здоровья. В случаях, когда анализ типа ПЦР показывает положительный результат, очень важна оперативная диагностика и внимание к любым изменениям самочувствия. После прохождения инкубационного периода энцефалита или боррелиоза, важно сдать лабораторные анализы, даже если клинические симптомы болезни не проявляются.

Отметим, что вся представленная информация, связанная со здоровьем и медициной, предназначена исключительно для ознакомления и не должна стать причиной для самодиагностики или самолечения.

В зависимости от того, какие симптомы преобладают, клещевой энцефалит может проявляться в нескольких формах. На Дальнем Востоке чаще встречаются очаговые формы, которые являются наиболее тяжелыми. В центрально-европейской части России преобладают неочаговые формы, которые, в свою очередь, являются менее серьезными.

Признаки поражения нервной системы можно заметить примерно через месяц после заражения - развиваются дефекты речи, возникает частичный паралич конечностей, наблюдаются перепады в настроении. Менингит развивается у некоторых больных, а также могут нарушаться сердечные ритмы.

Если не обратить внимания на болезнь, через год симптомы станут еще более серьезными - начиная от потери слуха и артрита до невралгии, сильной затрудненности с речью и потери ориентации в пространстве.

Переносчиками болезни Лайма, вызываемой спирохетоподобными бактериями, включая боррелию, являются иксодовые клещи. Те же самые насекомые распространяют энцефалит. Однако только 0,5-5,0% клещей из общей популяции относятся к числу носителей вирусов, а 20% - к носителям боррелии.

В случае болезни Лайма больной не заразится сразу после укуса клеща. Вирус живет в пищеварительной системе клеща, а не в его слюне. Это даёт некоторое время на удаление опасного насекомого. Однако нужно действовать быстро и правильно, чтобы не заболеть.

В случае болезни Лайма, главное - не допустить перехода заболевания на диссеминированную, распространенную или хроническую стадию. Боррелиоз лечится достаточно хорошо. При своевременном приеме антибиотиков в течение 2-4 недель практически гарантируется полное выздоровление.

Лечение энцефалита гораздо сложнее, чем лечение боррелиоза. И хотя возможно его излечение, но для этого используют разнообразные методы и лекарства. В отличие от боррелиоза, у клещевого энцефалита нет единого метода лечения, который гарантировал бы выздоровление.

Лечение проводится только в стационаре с применением широкого набора лекарственных средств, включающих патогенетические, симптоматические и этиотропные препараты. При комплексном лечении применяются лекарства, обладающие противовирусным, противовоспалительным, иммунологическим, нейропротекторным, детоксикационным, противоотечным, гормональным, психотропным и противосудорожным действием. Восстановительное лечение может включать ЛФК, трудотерапию, психотерапию, логопедию и т.д.

Нельзя не упомянуть о возможных серьезных последствиях энцефалита, таких как судороги, признаки деменции, атрофии мышц и другие расстройства ЦНС, которые могут сохраняться на всю жизнь.

Отметим, что наилучшей защитой от клещевого энцефалита являются антитела, образованные в организме человека. Их производство срабатывает в ответ на вакцину, которую следует делать в период осени, то есть за полгода до начала "клещевого сезона".

Кроме того, все чаще становятся популярными быстрые прививки, требующие три дозы вакцины в течение 21 дня. Эффективность такого профилактического мероприятия гарантирована на уровне от 91 до 97%. Лишь у 3% людей не вырабатываются антитела по статистике. Стоит отметить, что не существует вакцин от боррелиоза, и у человека нет возможности развивать стойкий иммунитет к бактерии, что возможно привести к повторной инфекции.

Боррелиоз не является заболеванием, которое передается от человека к человеку, однако возможна его передача плоду от беременной женщины через плаценту. Это объясняет появление заболевания у некоторых младенцев. Одним из признаков, общих для боррелиоза и энцефалита, является необходимость оперативной диагностики. Нельзя недооценивать это заболевание, которое может вызвать серьезные осложнения, вплоть до инвалидности или смертельного исхода.

В случае укуса клеща, анализ на энцефалит является обязательным. Анализ крови помогает оценить эффективность проведенной вакцинации, исследовать причины поражения центральной нервной системы и диагностировать болезнь при ее наличии. Также анализ крови на боррелиоз может быть назначен при обнаружении клеща и после лечения для оценки его эффективности. Лабораторная диагностика также позволяет исключать болезни, которые поражают кожу, нервную и сердечно-сосудистую систему неясной этиологии, артрит и другие заболевания, у которых есть сходные признаки.

Исследование наличия боррелиоза в организме человека представляет сложность, поскольку боррелии могут присутствовать в пораженных тканях или жидкостях, таких как кожа на краях эритремы, ликвор или кровь. Однако, проведение прямых исследований на наличие боррелий имеет невысокую эффективность - всего около 50%. Поэтому для диагностики боррелиоза используются косвенные методы.

Среди косвенных методов выделяются серологические тесты, которые являются наиболее простым и показательным способом. В таких тестах проводится исследование крови пациента на наличие антител к спирохете. Для введения дополнительной диагностики исследуют спинномозговую и синовиальную (суставную) жидкости. Однако, наиболее эффективным является именно общий анализ крови.

По данным исследований, проведенных в лабораториях, было выяснено, что для диагностики боррелиоза необходимо доставить в лабораторию клеща непосредственно после его удаления с тела пациента. Это позволяет своевременно выявить наличие боррелий и исключить развитие инфекции в организме человека.

Различные методы используются для анализа на боррелиоз, различаясь основным биоматериалом, принципами и показаниями проведения.

Хемилюминесцентный иммуноанализ является основным методом подтверждения диагноза, который использует сыворотку венозной крови для исследования антител IgG и IgM к возбудителю заболевания. Необходимо провести этот метод анализа в правильные сроки, так как антитела в крови появляются через 2-4 недели после начала заболевания. Точность анализа составляет 95%, при этом ложноположительные результаты не превышают 5% во избежание ошибок, в сомнительных случаях проводят иммуноблот.

Иммуноблот (вестерн-блот), который используют там, где иммуноанализ дал отрицательный результат, повышает точность диагностики у пациентов с симптомами боррелиоза, например, у тех, кто уже перенес болезнь. Метод использует венозную кровь и даёт более расширенную информацию о наличии антител к 10 антигенам боррелий. Повторный анализ следует производить через 3-6 недель, чтобы подтвердить первичный результат.

ПЦР с детекцией в режиме реального времени используется для исследования суставной и спинномозговой жидкости в случаях, когда серологические исследования не дают информации, например, для ранней диагностики. Этот метод определяет ДНК как живых, так и неактивных бактерий, но не может использоваться самостоятельно для установления окончательного диагноза, а служит дополнением к основным анализам.

ПЦР-исследование клеща позволяет обнаружить фрагменты ДНК возбудителей болезней в клеще. Клеща следует привезти в лабораторию вместе с контейнером или пробиркой для биоматериала, вне зависимости от того живой он или мертвый. Анализ занимает несколько дней.

Жители эндемичных по боррелиозу территорий должны незамедлительно обратиться к врачу-инфекционисту сразу после укуса клеща.

Фото: freepik.com